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基礎信息Product information
產品名稱：
大鼠表皮成纖維細胞
產品簡介：
大鼠表皮成纖維細胞公司正在出售的產品：鋅指蛋白98抗體 磷酸化自噬相關蛋白9A抗體 NADSYN1蛋白抗體 大鼠表皮成纖維 雞腎小管上皮細胞
產品型號：
廠商性質：經銷商
訪問量：519
更新時間：2025-04-09
產品特性Product characteristics
大鼠表皮成纖維細胞
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7475 |
細胞簡介：
大鼠表皮成纖維分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠表皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠表皮成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
人原卟啉原氧化酶(PPOX)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human PPOX (Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit
人堿性唾液脯酸豐富蛋白1(PRB1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human PRB1 (Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit
人叉頭框蛋白C1(FOXC1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FOXC1 (Forkhead Box Protein C1) ELISA Kit
人叉頭框蛋白O1(FOXO1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 大鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)檢測試劑盒
HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAkit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCystatinC,Cys-C檢測試劑盒人半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測試劑盒規格：96T/48T
組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次
HumanpodocinELISAKit人Podocin檢測試劑盒規格：96T/48T
嗅覺受體5AR1抗體
p21活化蛋白激酶ARHG7抗體
IL5重組狗 IL5 蛋白 Protein
OPG(Osteoprotegerin 0.5mgOPG(Osteoprotegerin) 護骨素(多肽抗原)
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (Fc 標簽) Protein
KCT2 Protein Human 重組人 KCT2 / C5orf15 蛋白
CNTF Protein Mouse 重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白
OPG(Osteoprotegerin 0.5mgOPG(Osteoprotegerin) 護骨素(多肽抗原)
KCT2 Protein Human 重組人 KCT2 / C5orf15 蛋白
IL5重組狗 IL5 蛋白 Protein
CNTF Protein Mouse 重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠表皮成纖維細胞豬褪黑素(MT/MLT)檢測試劑盒
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1 (TIMP-1) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)檢測試劑盒
GuineaPiglipidperoxlde,LPOELISAKit 豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforANKRD1(Humancardiacankyriepeatdomain1)ELISAKit人心肌錨蛋白重復域1
血液超氧化物陰離子比色法定量檢測試劑盒20次
Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit豬促胃液素受體(GsaR)檢測試劑盒規格：96T/48T
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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