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基礎信息Product information

產品名稱：

兔胚胎肢芽間充質干細胞

產品簡介：

兔胚胎肢芽間充質干細胞公司正在出售的產品：大鼠晶狀體上皮細胞 TE-5人食道癌細胞氨基丁酸轉運蛋白VGAT抗體 PA319 (人大腸癌細胞) 跨膜蛋白166抗體 GC-2spd (ts) (小鼠精母細胞) RRP9蛋白抗體 G蛋白偶聯受體137C抗體

產品型號：

廠商性質：經銷商

訪問量：1255

更新時間：2025-04-09

產品特性Product characteristics

兔胚胎肢芽間充質干細胞

兔胚胎肢芽間充質干細胞

商品屬性：

組織來源	產品規格	細胞形態	貨號
胚胎：	5×105cells/T25細胞培養瓶	成纖維細胞樣	YS-01X8407

細胞簡介：

兔胚胎肢芽間充質干分離自胚胎肢芽；胚胎肢芽存在于兩棲類以上的大多數脊椎動物胚胎中，在四肢發生的初期階段，在身體兩側有呈芽狀的突起，內部是中胚層側板的體壁板垱厚形成，表面有表皮覆蓋。在這個中胚層區肢芽迅速伸長，不久，在其前端即見有指的突起。在此時期間，其內部的中胚層分化成軟骨、肌肉等。這些分化組織，在將肢芽作分離培養的時候也可以獲得。根據對兩棲類的有尾類的研究，作為肢原基各部的胚發能力，肢芽物質的大部分是位于背半部，而前半部主要參與基部形成，后半部參與前端的形成。在實驗上，即使將肢的原基分成二半，每一半調整好都可形成基本上近于正常形態的肢體，而且肢體各軸的極性和側性也逐漸決定。間充質干細胞（MSC）是屬于中胚層的一類多能干細胞，主要存在于結締組織和器官間質中，是具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量，并在特定條件下轉變成為一種或多種構成機體組織或器官的細胞，從而在組織修復等方面發揮積極作用。

原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介：

實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質干采用-膠原酶聯合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔胚胎肢芽間充質干體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

兔胚胎肢芽間充質干細胞

細胞傳代及凍存：

細胞傳代步驟

細胞凍存步驟

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

兔胚胎肢芽間充質干細胞