原來這就是活化素Aelisa試劑盒的測定步驟

　　活化素Aelisa試劑盒檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。

　　試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　活化素Aelisa試劑盒的測定步驟：

　　1、加樣

　　①除包被外都需45度加樣

　　②加樣體積要準確

　　③管底加樣，不能加在管壁上

　　④加樣時不能產(chǎn)生氣泡

　　2、溫浴

　　①加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫度的水浴箱。

　　②各ELISA板不應疊在一起。

　　③為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。

　　④加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

　　3、洗滌

　　①洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻是決定實驗成敗的關鍵。

　　②目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。

　　4、讀板

　　①陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般可采用目視比色。

　　②如用酶標儀測定結果，準確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質量和軟件的算法。