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轉基因水稻TT51-1(BT63)基因核酸檢測試劑盒反應五要素

日期:2021-10-20瀏覽:1587次

轉基因水稻TT51-1(BT63)基因核酸檢測試劑盒反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

帕金森病相關蛋白ATP13A2抗體

肌側索硬化蛋白2抗體

磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體

酰基輔酶A脫氫酶長鏈抗體

細胞分裂周期蛋白5抗體

β淀粉樣肽/Aβ42抗體

ADCK4蛋白抗體

抑癌蛋白AIMP3抗體

蛋白激酶A錨定蛋白6抗體

肺α/β水解酶蛋白1抗體

水解酶結構域蛋白13抗體

水解酶結構域蛋白14B抗體

水解酶結構域蛋白15抗體

肺α/β水解酶蛋白3抗體

三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白F亞基3抗體

三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白A亞基5抗體

ADCK1蛋白抗體

酰基輔酶A結合結構域蛋白4抗體

α/β水解酶4抗體

ADCK2蛋白抗體

乙醛脫氫酶16家庭A1抗體

粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體

乙醇脫氫酶1抗體

δ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體

肌側索硬化癥相關蛋白4抗體

α2巨球蛋白(α-2M)抗體

ACCSL蛋白抗體

甲胎蛋白抗體

β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體

星形肌動蛋白抗體

系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體

磷酸化系統性紅斑狼瘡先關蛋白TREX1抗體

磷酸化系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體

接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體


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